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t4 dna ligase t4噬菌体dna连接酶 promega m1801s 上海桥星生化试剂
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所属分类:酶和辅酶类
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t4 dna ligase t4噬菌体dna连接酶
promega m1801s
上海桥星生化试剂 - 酶和辅酶

上海桥星生物

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t4 dna ligase   t4噬菌体dna连接酶

产品编号        规 格        价 格
t8400-100       100u       535.00

说明:t4噬菌体dna连接酶主要催化两条dna链上相邻的5’磷酸基和3’-qiang基之间形成磷酸二酯键。它的主要用途是连接带匹配粘端的dna分子,或使平端的双链dna分子互相连接或与合成接头相连接。也可催化dna与rna之间以及少数rna之间的连接,但不能催化单链dna之间的连接。

单位定义:0.01weiss单位的t4 dna连接酶可以在16℃下反应20分钟,连接95%的1μgλdna-hindⅲ的分解物。

注意:一个weiss单位的t4 dna连接酶相当于核酸外切酶测定中的0.2单位或60个粘性末端(new england biolabs)

存储缓冲液:10mm tris-hcl(ph7.5 25℃),50mm kcl,

1mm dtt,0.1mm edta和50%glycerol。

10×反应缓冲液:300mm tris-hcl(ph7.8 25℃),

100mm mgcl2,100mm dtt,10mm atp

质量控制:

1 活性:大于3weiss单位/微升。

2 蓝白克隆鉴定:12weiss单位t4 dna连接酶与3μg经内切酶酶切产生的5’或3’粘性末端dna在4℃下,反应16小时后转化到大肠杆菌jm109培养,白色菌落小于总菌落数的2%;12 weiss单位t4 dna连接酶与3μg经内切酶酶切产生的钝性末端dna在4℃下,反应16小时后转化到大肠杆菌jm109培养,白色菌落小于总菌落数的5%。

3 核酸内切酶测定:20weiss单位酶与1μg超螺旋质粒dna在37℃下反应16小时,dna的电泳图谱不发生变化。

4 单链和双链dnase测定:20weiss单位酶与50ng同位素标记的单链或双链dna反应16小时,单链dna的释放量小于2%,双链dna的释放量小于1%。

5 rnase测定:37℃时,20weiss单位酶与50ng 3h-rna保温5小时,释放量小于1%。

6 蛋白纯度:sds page 检测纯度≥90%。

储存条件:−20℃

from promega m1801s

 

订货:021-6567 2052/182 2179 4820(蒋),:

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