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taq dna polymerase taq dna 聚合酶
产品编号 规 格 价 格
t8410-500 500u 200.00
产品简介:本制品是94kd的耐热的dna聚合酶。是把thermusaquaticusdna polymerase的基因经过克隆转化到大肠杆菌中进行表达后,分离提取而得到的。它与天然taq dna聚合酶具有相同的功能。
该酶反应需mg2 参与,它以双链dna为模板催化核苷酸从5’向3’末端形成双链dna。该酶同时具有5’→3’核酸外切酶活性。该产品主要用于dna的pcr扩增,dna测序,可以很好地扩增1kb地dna片段。该产品主要包括酶、10×反应缓冲液与氯化镁溶液。
单位定义:在74℃,30分钟内,能够吸收10mmol dntp,形成酸性不溶性物质所需的酶量为一个活性单位。
酶储存缓冲液b:
50%甘油,20mm tris-hcl(ph8.0),100mm kcl,1mm dtt,0.1mm edta,0.5%tween20和0.5%nonidet p40。
配套试剂:
1.10×反应缓冲液(不含mgcl2): taq dna polymerase 10 x reaction buffer (without mg2 )包含 500mm kcl,100mm tris-hcl (ph9.0, 25℃), 1% triton x-100.建议该缓冲液加入每种dntp的zui适浓度为0.2毫摩尔。
2.25mm mgcl2:反应中镁离子在混合物中的zui终浓度由使用者根据自己需要决定。建议使用浓度在1-4毫摩尔。注:使用前*溶解氯化镁溶液并充分振荡几秒钟。
3.10x反应缓冲液(含mgcl2):包含 15mm mgcl2,500mm kcl, 100mm tris-hcl (ph9.0, 25℃), 1% triton x-100. 建议该缓冲液加入每种dntp的zui适浓度为0.2毫摩尔。注意:反复冻融可能会引起氯化镁沉淀,将缓冲液在90℃加热10分钟能恢复溶液的均一性。
质量控制:
1. 活性:大于5单位/微升。
2. overdigest (od) 检测: 30单位taq dna 聚合酶与1微克λdna在74℃下反应16小时后,用琼脂糖凝胶电泳未检出降解的λdna。
3. 切口酶检测: 30单位taq dna 聚合酶与1微克超螺旋质粒dna在74℃下反应4小时后,用琼脂糖凝胶电泳未检出切口酶或线性dna带。
4. 热稳定性检测: 94℃时,每微升5单位taq dna 聚合酶在缓冲液中的半衰期长于1小时。
储存条件:−20℃
from promega m1665s
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